martes, 23 de junio de 2009

etapas de las practicas

etapa pre-analitica
  • practica 1 y 2

etapa analitica

  • practica 3
  • practica 4
  • practica 5
  • practica 6
  • practica 7

etapa post-analitica

  • practica 8
  • practica 9

practica 8

PRACTICA 8

PRUEBA DE AGLUTINACION

MÉTODO DE PRUEBA RÁPIDA EN PLACA. Ejemplo de técnicaa) Al paciente se le realiza una venopunción, extrayendo la sangre en un tubo sin anticoagulante (Tapón rojo), y es centrifugada por 10 minutos a 3000 revoluciones por minuto. Se separa el suero el cual se utiliza para la determinación de los anticuerpos (puede extraerse con pipetas semiautomáticas).
Marcar en una placa de vidrio correctamente indicando el antígeno que se esté usando:(En este caso serian los antígenos):Tífico “O” - Salmonella typhi; Antígeno somático, pH: 6.5 ± 1.0Tífico “H” - Salmonella typhi; Antígeno flagelar, pH: 6.5 ± 1.0
NOTA: El reactivo así como los sueros, deben alcanzar la temperatura ambiente para comenzar la prueba.
PROCEDIMIENTO:1. Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientes cantidades del suero a analizar: 0.08mL, 0.04mL, 0.02mL, 0.01mL y 0.005 mL (EL SUERO DEBE ESTAR TOTALMENTE CLARO).2. Agitar el antígeno a utilizar para tener una suspensión uniforme.3. Añadir 30 mL de la suspensión de antígeno a cada una de las diferentes cantidades de suero. Se recomienda utilizar pipetas automáticas (el gotero incluido proporciona una gota de 30-40 mL).4. Mezclar el antígeno y el suero utilizando un aplicador diferente para cada una de las cantidades de suero.5. Girar la placa manualmente o utilizando un agitador mecánico (120 rpm) durante 2 minutos.6. Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa y observar la aglutinación macroscópica.7. Se recomienda incluir controles Positivo y Negativo.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOSEl grado de aglutinación se registra como sigue:
4+ Aglutinación del 100% de los organismos3+ Aglutinación del 75% de los organismos2+ Aglutinación del 50% de los organismos1+ Aglutinación del 25% de los organismos- Aglutinación del 0% de los organismos
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO1. Algunos sueros normales pueden dar un titulo de 1:20 a 1:40 y hasta 1:80 pero esto puede ser debido a vacunaciones o alguna infección anterior. No siempre se presenta producción de aglutininas en infecciones bacterianas.2. Se pueden producir reacciones cruzadas de aglutininas debido a vacunaciones para ciertas enfermedades. La vacuna tífica puede producir aglutininas contra antígenos Proteus.3
CONCLUSIÓN:El diagnóstico exacto de la enfermedad depende del acercamiento entre el laboratorio clínico y el médico, ya que la elevación del título en la muestra de suero con sintomatología reciente y la muestra de suero en fase convaleciente indicará la exactitud del diagnóstico. El paciente con salmonelosis cursa con un cuadro donde aparecen escalofríos , cefalea, náuseas, anorexia, tos y diarrea o estreñimiento. La fiebre es prolongada y varía de 38,5ºC a 40ºC. Entre un 20-40% presentan dolor abdominal. Se sugiere que se le realice al paciente un coprocultivo (cultivo de las heces fecales). Debe crecer salmonella, identificándose la especia por medio de pruebas bioquímicas.

practica 7

PRACTICA 7

Observacion microscopica

La laminilla ya preparada y lista se monta en el microscopio se asegura
Con las pinsas de la platina y se observa a 100 x donde encontramos bacterias en binas esfericas en formas de baston y que ambas las podemos encontrar de 1 hasta 4 piezas desde separadas y juntas, en cadena.


Materiales.
Porta objeto teñido
Aceite de inmercion

practica 6

Practica 6
Tincion de gram

Primero que hicimos fue prneder los mecheros para pasar los porta objeto con las muestras.
Bueno primero empezamos esterilizando el asa para poner la mescla en el porta objeto
Y asi pasarlas por el fuego. Después de eso las colocamos en las siguientes tinciones;
1. colocar el frotis en solucion crital violeta durante 1min.
2. lavar con solucion yodada (lugol)
3. cubrir frotis con lugol durante 1 min.
4. enjuagar con alcohol hasta que no oscurra cristal violeta
5. lavar con h2o
6. constrastar con la solucion de fusina porl
7. lavar con h2o
8. agregar una gota de aceite de inmercion



y ya las colocamos para observarlas en el microscopioPractica 6
Tincion de gram

Primero que hicimos fue prneder los mecheros para pasar los porta objeto con las muestras.
Bueno primero empezamos esterilizando el asa para poner la mescla en el porta objeto
Y asi pasarlas por el fuego. Después de eso las colocamos en las siguientes tinciones;
1. colocar el frotis en solucion crital violeta durante 1min.
2. lavar con solucion yodada (lugol)
3. cubrir frotis con lugol durante 1 min.
4. enjuagar con alcohol hasta que no oscurra cristal violeta
5. lavar con h2o
6. constrastar con la solucion de fusina porl
7. lavar con h2o
8. agregar una gota de aceite de inmercion



y ya las colocamos para observarlas en el microscopio

practica 5

frotis


Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijación de una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfología y bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.

Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio. Es necesaria muy poca cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa de siembra, ya que en el extremo curvo de su filamento queda retenida una mínima gota de agua, que resulta suficiente.

Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones asépticas, una pequeña cantidad del cultivo bacteriano en medio sólido y transferirlo a la gota de agua. Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensión homogénea que quede bastante extendida para facilitar su secado.Si la muestra se toma de un cultivo en medio líquido, no es necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta con colocar y extender una gota de la suspensión bacteriana, que se toma con el asa de siembra, directamente sobre el portaobjetos.

Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación acercando el porta a la llama del mechero. En este caso hay que tener mucha precaución de no calentar demasiado el porta pues las células pueden deformarse o romperse.

practica 4

Practica #4
Observacion macroscopica
Mesa 4
2lv(m)
28/05/09

1-Nombre del medio: agar salmonella y shiga.

Nombre de la siembra: siembra de sigsne

Nombre de la muestra: sangre sentrifugada

Observaciones:en este medio no a habido resultados de colonias mas que
Vapor de agua .28/05/09.1:56pm


2- Nombre del medio: agar verde brillante

Nombre de la siembra: siembra por dispersión

Nombre de la muestra: orina (no centrifugada)

Observacuiones: no hubo resultados solo las marcas de la siembra. 28/05/09. 2:02pm


3- Nombre del medio: agar de hierro de kligler

Nombre de la siembra: siembra de tapis

Nombre de la muestra: h2o de lechuga

Observaciones: en esta caja hubo crecimiento de ongos de la lechuga. 28/05/09. 2:08pm

4- Nombre del medio: agar de mac conkey

Nombre de la siembra: siembra exagonal

Nombre de la muestra: muestra interdental

Observación: en esta muestra hay pequenos puntitos de caries.28/05/09. 2:9pm

5- Nombre del medio: agar dextosa

Nombre de la siembra: siembra por estrias

Nombre de la muestra: raspado de pies

Observación: vapor de h2o y pequenas manchitas 28/05/09


Desarrollo
El día 28 de mayo del 2008 observamos a simple vista las siembras y tomamos no ta de cada una de allas. Nosotros como alumnos debemos observar como estan las colonias de bacteriasque crecen de 24 a 72 hrs. Fueron 2 que no tubieron resultados de crecimiento el día 29 de mayo del 2008

practica 3

Desarrollo de practica 3
Sembrado del medio

Primero sacamos 2 mecheros y los colocamos en el campo de esterilización
Para inclinar las cajas petris y comenzar a poner las muestras que son las siguientes:
Orina
Sangre
H2o de lechuga
Raspado de pie
Muestra interdental

Ya teniendo estas muestras, las colocamos en el medio de cultivo y empezamos abrirlas para colocar las muestras en cada caja petri.

Materiales:
-5 o 7 cajas petri de medio de cultivo.
-Asa bacteriologica
-Vaso de precipitado con 25ml. de agua destilada.
-2 mecheros de bunsen
-Papel para mesa de laboratorio
-Tape
-Algodon secoAlgodones con alcohol
-Tubo conico de plastico
Muestras para siembras:
-Saliva
-Muestra interdental
-Orina
-Agua preparada
-Verduras
-Muestra de sangre
Tecnica de extraccion sanguinea:
Materiales:
-Jeringa 5ml.
-Torundas de algodon alcoholosadas
-Torniquete
Se realiza asepxia y antisepxia del pliegue del brazo utilizando una torunda de algodon con alcohol.Una vez realizado se debe asegurar la aguja a la jeringadandole un pequeño giro hasta que quede apretado. Una vez lista la jeringa y limpia la zona del pliegue se aplica el torniquete en la parte media del brazo para hacer precion t obtener una vaso dilatacion del conducto sanguineo, se intruduce la jeringa y se extraen 2.5ml. de sangre la que depositaremos en un tubo con tapon rojo sin anticuagulante.No se retita el tapon del tubo se introduce la aguja en el.Se deja coagular la sangre y se toma el tiempo se mete a la centrifuga para separar el paquete del plasma.Una vez separado el paquete del plasma se trasvasa a un tubo de ensaye vacio.Se sembrara el liquido plasmatico en medio de cultivo utilizando la tecnica con varilla de cristal denominada siembra por dispercion.

practica 1

Desarollo de practica # 1

Medio de cultivo y esterilizacion

Primero se peso el vidrio de reloj en la balanza granataria despues de eso hicimos los calculos con la regla de 3 para 6 cajas petris, ya teniendo los calculos de las cajas
Comenzamos a trabajar en el medio de cultivo, comenzamos con hechando el agua destilada en el matraz para medir lo obtenido que eran 114 ml de h2o, ya teniendo el agua Comenzamos a vaciar el polvo de agar de hierro en el matraz de e. comenzamos a revolver el agua con el agar hasta quedar bien batido lo encimamos en el mechero jirandolo varias veces cuidando que no se tirara ya estando listo con el color, lo colocamos en el auto clave para esterilizarlo por 15 min, ya termindo el tiempo lo sacamos del autoclave para dejarlo enfriar, ya tibio comenzamos a esterilizar la boquilla del matraz para hecharlo en las cajas petris, ya estando el liquido en las cajas petris lo dejamos para que se hiciera una tipo gelatina. Después le pusimos el nombre de agar y el # de mesa.

lunes, 8 de junio de 2009

bitacoras

Bitacora de manteniemito correctivo y preventivo


El Mantenimiento Correctivo:Consiste en la reparación de un equipo o máquina cuando se dispone del personal, repuestos, y documentos técnicos necesario para efectuarlo.


El mantenimiento preventivo: Es un procedimiento periódico para minimizar el riesgo de fallo y asegurar la continua operación de los equipos, logrando de esta manera extender su vida útil.

etapas

Control en la etapa preanalítica
En realidad se le ha prestado menos atención al establecimiento de las medidas de control de la calidad en las etapas de obtención, procesamiento y almacenamiento de las muestras que al resto del procesamiento analítico.6 En la hemostasia, la etapa preanalítica es una etapa clave, y de ella depende en gran medida el resultado final. Los objetivos de las normas de control de la calidad en la fase preanalítica son:

La correcta identificación del paciente, del solicitante y de la prueba solicitada.
Reducir al máximo la variabilidad intraindividual de los parámetros a medir.
Evitar el deterioro de la muestra mediante los procesos de obtención, manipulación transporte y conservación.

LA ETAPA ANALÍTICA

Este paso es clave en la Planificación Estratégica porque nos va a permitir conocer cuáles son
los principales problemas con los que nos enfrentamos, y a partir de los cuales deberemos
buscar las soluciones específicas. Requiere de un análisis realista, en él se basarán luego las
estrategias con las que se intentará revertir la situación apuntando al logro de los objetivos
propuestos.
En el análisis de las fortalezas y debilidades se deberán tener en cuenta los recursos humanos,
tecnológicos, financieros, físicos y organizacionales. Será necesario analizar cada uno por
separado para determinar en cuáles nos vamos a apoyar. La detección de las debilidades
servirá para elaborar las estrategias de planificación.
Se requerirá creatividad a la hora de evaluar los recursos y no agotar las posibilidades en un
mismo en el contexto más cercano. Este es uno de los desafíos de la planificación.
Los recursos humanos son las personas con las que trabajamos y las potencialidades y
debilidades que ellos y nosotros tenemos en la tarea.
Los recursos tecnológicos son aquellos elementos con los que contamos para realizar mejor
nuestro trabajo. Cuando podemos contar con ellos nos fortalecen, cuando no, significan
verdaderos puntos débiles.

etapa post-analitica:
es la entrega de los resultados al paciente.

frotis

Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijación de una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfología y bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.

  1. Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio. Es necesaria muy poca cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa de siembra, ya que en el extremo curvo de su filamento queda retenida una mínima gota de agua, que resulta suficiente.

  2. Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones asépticas, una pequeña cantidad del cultivo bacteriano en medio sólido y transferirlo a la gota de agua. Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensión homogénea que quede bastante extendida para facilitar su secado.Si la muestra se toma de un cultivo en medio líquido, no es necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta con colocar y extender una gota de la suspensión bacteriana, que se toma con el asa de siembra, directamente sobre el portaobjetos.

  3. Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación acercando el porta a la llama del mechero. En este caso hay que tener mucha precaución de no calentar demasiado el porta pues las células pueden deformarse o romperse.

investigacion #3 de la unidad 3

Tinciones

DESARROLLO:
Mecanismos de Coloración:
La coloración celular y tejidos son una combinación de fenómenos físicos y químicos de absorción: los fenómenos físicos de absorción, capilaridad y ósmosis participan en cierto grado. La afinidad de colorantes básicos por los tejidos ácidos y viceversa indican que hay reacción química.

Los Colorantes:
Son compuestos, orgánicos que contienen radicales cromóforos esto es que producen color y grupo de anxocromos que forman sales los grupos nitrito (-NO2) y azo (-N = N) son cromóforos. Los radicales hidroxilo (-OH) y amino (-NH2) son grupos anxocromos. Los cromóforos imparten la propiedad cromógena al colorante y los anxocromos permiten que el colorante se una con la fibra o tejido.

Preparación de Frotis Bacteriano para Coloración:
Entes de la tinción las bacterias suelen encontrarse en agua o en otro líquido en un porta objeto limpio y son extendido en una película uniforme y delgada. Se deja que la película seque en el aire y los microorganismos son fijados por sustancias químicas o por el calor moderado.

Tinciones:
Es un método utilizado para estudiar microorganismos. (no vivos); en estas tinciones se observa morfología, estructura y agrupamientos de microorganismos.

Tipos de Tinción:
Tinción Simple: utiliza un solo colorante.

Tinción de Gram:
Utiliza varios colorantes (cristal violeta 1m, Yodo 1m, lavado con alcohol, Safranina 30 seg)

Tinción Ácido Resistente:
Una vez teñidos, conservan su color resistiendo al lavado con ácido mineral reducido. En esta tinción las bacterias ácido resistentes conservan el colorante primario color rosa o rojo, los demás microorganismos son decolorados por el ácido y toman el color azul.

Tinción de Giensa:
El colorante se aplica a un frotis de sangre y se utiliza cuando se sospeche de protozoos en la sangre para observar materias núcleos de la células.

Tinción de Esporas:
Se usa verde de malaquita en contraste con safranina.

Tinción de Cápsula:
Colorante nigrosuna, aquí se observa microorganismos encapsulados creando resistencias.

Tinción de Flagelos:
Se usa mordiente el cual aumenta el tamaño del microorganismo.

Endósporas:
Son unos cuerpos resistentes que se producen en el interior de la célula los cuales contienen los componentes necesarios para conservar la vida.
Las esporas pueden situarse en el centro de la célula o en situaciones excéntricas cerca de un extremo de la misma.

Levaduras:
Son esféricas, elípticas y cilíndricos, su tamaño varía notablemente. Son hongos cuya forma corriente y dominante de crecimiento es unicelular.

Las Cápsulas:
Son estructuras grueso viscosas gelatinosas que rodean las células de algunas especies.

Sarcina:
Son anaerobios obligados y son extremadamente ácido – tolerantes que pueden fermentar azúcares y crecer a pH inferior a 2.
Este género comprende 2 especies de bacterias que se dividen en tres planos perpendiculares para producir paquetes de 8 en una célula.

Bacillus Cereus:
La mayoría se encuentra en el suelo o en partículas de polvo en suspensión y son uno de los organismos del género Bacillus que pueden ser aislados fácilmente.
Puesto que los formadores de esporas pueden aislarse selectivamente a partir del suelo, alimentos o de otro material dejando las muestras a 80 ºC durante 10 minutos.
Los bácillus suelen crecer en medios sistemáticos que contengan azúcares, ácidos orgánicos, alcoholes, etc, como única fuente de carbono y amoníaco como única fuente de nitrógeno.

Análisis de Resultados:
Existe varios tipos de tinciones de los cuales estudiamos:
Tinción de Gram
Tinción simple
Tinción de esporas
Tinción de Gram:
Dividida en gram positivo y gram negativo, en el caso de los gram (+) la muestra fue sarcina, puesto que una tonalidad violeta fijada en su estructura determina la presencia de la misma puesto que fijó en su estructura el cristal violeta.
Y en el gran (-) utilizamos salmonella identificada por la presencia de muchas estructura un poco triangulares de color rojo.
En la muestra de la práctica anterior 3 eran gran positivo por su coloración morada.

Tinción Simple:
Estudia levaduras, en este experimento se usa un solo colorante que fue azul de metileno, donde observamos que las levaduras tenían cocos. Estas células bacterianas difieren desde el punto de vista químico de su medio exterior y por eso se tiñen contrastando con su alrededor.

Tinción de Esporas:
La bacteria es una estructura muy pequeña, sin embargo, por medio de esta tinción pudimos observar la estructura interna de la célula bacteriana, particularmente las endosporas, en este experimento se utiliza una tinción simple debido a que la misma permite que se coloree toda la célula excepto la espora que se observa de un tamaño bien aceptable.