Tinciones
DESARROLLO:
Mecanismos de Coloración:
La coloración celular y
tejidos son una combinación de fenómenos físicos y químicos de absorción: los fenómenos físicos de absorción, capilaridad y ósmosis participan en cierto grado. La afinidad de colorantes básicos por los
tejidos ácidos y viceversa indican que hay reacción
química.
Los Colorantes:
Son compuestos, orgánicos que contienen radicales cromóforos esto es que producen
color y
grupo de anxocromos que forman sales los
grupos nitrito (-NO2) y azo (-N = N) son cromóforos. Los radicales hidroxilo (-OH) y amino (-NH2) son
grupos anxocromos. Los cromóforos imparten la
propiedad cromógena al colorante y los anxocromos permiten que el colorante se una con la fibra o tejido.
Preparación de Frotis Bacteriano para Coloración:
Entes de la tinción las bacterias suelen encontrarse en
agua o en otro líquido en un porta objeto limpio y son extendido en una película uniforme y delgada. Se deja que la película seque en el
aire y los microorganismos son fijados por sustancias químicas o por el
calor moderado.
Tinciones:
Es un
método utilizado para estudiar microorganismos. (no vivos); en estas tinciones se observa
morfología, estructura y agrupamientos de microorganismos.
Tipos de Tinción:
Tinción Simple: utiliza un solo colorante.
Tinción de Gram:
Utiliza varios colorantes (cristal violeta 1m, Yodo 1m, lavado con
alcohol, Safranina 30 seg)
Tinción Ácido Resistente:
Una vez teñidos, conservan su
color resistiendo al lavado con ácido mineral reducido. En esta tinción las bacterias ácido resistentes conservan el colorante primario color rosa o rojo, los demás microorganismos son decolorados por el ácido y toman el color azul.
Tinción de Giensa:
El colorante se aplica a un frotis de
sangre y se utiliza cuando se sospeche de protozoos en la
sangre para observar materias núcleos de la
células.
Tinción de Esporas:
Se usa verde de malaquita en contraste con safranina.
Tinción de Cápsula:
Colorante nigrosuna, aquí se observa microorganismos encapsulados creando
resistencias.
Tinción de Flagelos:
Se usa mordiente el cual aumenta el tamaño del microorganismo.
Endósporas:
Son unos cuerpos resistentes que se producen en el interior de
la célula los cuales contienen los componentes necesarios para conservar la vida.
Las esporas pueden situarse en el centro de la
célula o en situaciones excéntricas cerca de un extremo de la misma.
Levaduras:
Son esféricas, elípticas y cilíndricos, su tamaño varía notablemente. Son
hongos cuya forma corriente y dominante de crecimiento es unicelular.
Las Cápsulas:
Son
estructuras grueso viscosas gelatinosas que rodean las
células de algunas especies.
Sarcina:
Son anaerobios obligados y son extremadamente ácido – tolerantes que pueden fermentar azúcares y crecer a
pH inferior a 2.
Este
género comprende 2 especies de bacterias que se dividen en tres planos perpendiculares para producir paquetes de 8 en una
célula.
Bacillus Cereus:
La mayoría se encuentra en el
suelo o en partículas de polvo en suspensión y son uno de los organismos del
género Bacillus que pueden ser aislados fácilmente.
Puesto que los formadores de esporas pueden aislarse selectivamente a partir del
suelo,
alimentos o de otro material dejando las muestras a 80 ºC durante 10 minutos.
Los bácillus suelen crecer en
medios sistemáticos que contengan azúcares,
ácidos orgánicos,
alcoholes, etc, como única fuente de
carbono y amoníaco como única fuente de nitrógeno.
Análisis de Resultados:
Existe varios tipos de tinciones de los cuales estudiamos:
Tinción de Gram
Tinción simple
Tinción de esporas
Tinción de Gram:
Dividida en gram positivo y gram negativo, en el caso de los gram (+) la
muestra fue sarcina, puesto que una tonalidad violeta fijada en su estructura determina la presencia de la misma puesto que fijó en su estructura el cristal violeta.
Y en el gran (-) utilizamos salmonella identificada por la presencia de muchas estructura un poco triangulares de color rojo.
En la
muestra de la práctica anterior 3 eran gran positivo por su coloración morada.
Tinción Simple:
Estudia levaduras, en este experimento se usa un solo colorante que fue azul de metileno, donde observamos que las levaduras tenían cocos. Estas células bacterianas difieren desde el punto de vista químico de su medio exterior y por eso se tiñen contrastando con su alrededor.
Tinción de Esporas:
La bacteria es una estructura muy pequeña, sin embargo, por medio de esta tinción pudimos observar la estructura interna de
la célula bacteriana, particularmente las endosporas, en este experimento se utiliza una tinción simple debido a que la misma permite que se coloree toda la célula excepto la espora que se observa de un tamaño bien aceptable.